بررسی شرایط تولید آنزیم و تکثیر ژن بتاگلوکوزیداز در جدایه های مختلف قارچ Aspergillus sp.

در این تحقیق ابتدا با روش غربالگری سریع (Rapid screeninig) ، ۱۳ جدایه آسپرژیلوس از نظر تولید آنزیم های سلولازی مورد بررسی قرار گرفتند. قطر مربوط به ناحیه شفاف اطراف كلنی جدایه های مختلف نشان دهنده تفاوت فعالیت سلولازی در بین جدایه های مورد نظر بود. بیشترین قطر در جدایه R۴ (۴۱ میلی متر) و كمترین در جدایه های ۵۰۲۱ و M۲ (۱۵ میلی متر) بود، كه بیانگر بالاترین و پایین ترین میزان فعالیت سلولازی است. سپس شرایط بهینه جهت تولید آنزیم بتا ۱ و۴ گلوكوزیداز مورد مطالعه قرار گرفت. كه میزان آن عبارتست از ، ۸pH= ،مدت كشت ۴۸ ساعت ، منبع كربن CMC و القا كننده لاكتوز است این شرایط بهینه فعالیت آنزیمی بتاگلوكزیداز برای ۱۳ جدایه آسپرژیلوس مورد بررسی قرار گرفت. نتایج بدست آمده نشان داد كه جدایه های R۲، R۳، R۴، M۳، M۲ و ۵۰۱۰ بیشترین و جدایه های ۵۰۱۱، M۳a و ۵۱۵۴ كمترین فعالیت ویژه آنزیمی را دارند. همچنین جهت شناسایی ژن كد كننده آنزیم بتا-۱و۴ گلوكزیداز استخراج DNA ژنومی به روش CTAB صورت گرفت. برای ژن بتا- ۱و۴- گلوكوزیداز با استفاده از دو پرایمر اختصاصی (CPA۱,CPA۲) قطعه مورد انتظار به طول bp ۲۸۰۶ تكثیر شد وتهیه الگوی هضم آنزیمی (restriction pattern) با دو آنزیم PstI و SalI قطعه مذكور را تایید نمود.

منبع : مجله زیست شناسی ایران