استفاده از روش الیزا برای اندازه گیری آنتی بادی های IgG،IgM،IgA اختصاصی علیه آنتی ژن لیپوپلی ساکارید باکتری سالمو نلا تیفی موریوم در سرم مرغان آلوده شده به روش تجربی

در این تحقیق با استفاده از روش الیزای غیر مستقیم مرحله ای ایمنو گلوبولین هایIgG،IgM،IgA در سرم جوجه های مورد آزمایش اندازه گیری گردید. به این منظور ۴۲ قطعه جوجه گوشتی یك روزه عاری از سالمو نلا تهیه و سپس از طریق خوراكی با سالمو نلا تیفی موریوم تلقیح و به ۶ گروه هفت قطعه ای تقسیم شدند. از اعضای هر گروه در یكی از سنین ۱ تا ۶ هفتگی پس از تلقیح خونگیری شد و سرم آنها جمع آوری گردید . از ۴۲ قطعه جوجه گوشتی یك روزه عاری از سالمو نلا به عنوان گروه كنترل استفاده شد كه اعمال گروه بندی و خونگیری آنها دقیقآ مطابق با گروه آزمایشی انجام شد به استثناء این كه در گروه كنترل سالمو نلا تلقیح نشد . به منظور راه اندازی آزمایش الیزا از LPS سالمو نلا تیفی موریوم به عنوان آنتی ژن استفاده شد و با تدوین آزمایش الیزا برای هر ایمنو گلو بولین به طور جداگانه ، به بررسی آنتی بادی های IgG،IgM،IgA پرداخته شد .آ مده نتایج بدست آمده حاكی از آن است كه هر سه ایمنو گلو بو لین در سرم جوجه های مورد آزمایش وجود داشته و قابل اندازه گیری می باشند . اولین آنتی بادی پدیدار شده IgMبوده كه در سه هفته پس از تلقیح تیتر آن به ۲۵۶۰ :۱ رسید . این تیتر تا هفته پنجم و ششم بالا مانده و به تیتر ۳۰۰۰ :۱ افزایش یافش یافت . در گروه كنترل تیتر IgM در سرم جوجه ها دیده شد كه در مقایسه با گروه تلقیح شده نامحسوس بوده و در هفته سوم به تیتر ۳۲۰ :۱ رسید ، كه حداقل سه تیتر پایین تر از گروه آرمایش می باشد . IgA در هفته اول و دوم تیتر ۳۲۰ :۱ داشته و از تیتر بالا تری نسبت به IgM برخوردار بود كه احتمالآ به علت آنتی بادی های مادری می باشد . پس از آن قابل ملاحظه ای در هفته سوم پیدا می كند و در شش هفتگی به حداكثر مقدار خود رسیده است . بر خلاف آنتی بادی های IgA ،IgMآنتی بادی IgG تا هفته چهارم تیتر ۸۰ :۱ داشت كه پایین می باشد و پس از آن در هفته پنجم بالا رفته و تیتر آن افزایش یافت به تیتر ۱۲۸۰ : ۱ رسید و در شش هفتگی پس از تلقیح به بالاتر از ۳۰۰۰ :۱ رسید كه حداكثر میزان آن است . نتایج بدست آمده نشان می دهند كه در اثر عفو نت با سالمو نلا تیفی موریوم پاسخ ایمنی هومورال بوجو د می آید و با بكارگیری تكنیك الیزا می توان به بررسی ایمنو گلو بولین های ایجاد شده در اثر عفو نت با سالمو نلا تیفی موریوم پرداخت .از آنجا كه IgG دیرتر از دو كلاس دیگر بالا می رود ، مشخص شده است كه این آنتی بادی تا مدت ها پس از عفو نت حتی هنگا می كه هیچ سالمو نلا یی از مدفوع پرنده جدا نمی شود ، وجود داشته و قابل ارزیابی است . بنا براین با استفاده از الیزا و با ارزیابی ایمنو گلو بو لین IgG به روش قابل قبولی برای نشان دادن عفو نتی كه قبلآ در گله رخ داده است می توان دســت یافـــت .

منبع : مؤسسه مرغداری ایران