مطالعه اثر مهار کنندگی پروتئینهای ممانعت کننده فعالیت آنزیم

مطالعه اثر مهار کنندگی پروتئینهای ممانعت کننده فعالیت آنزیم پلی گالاکتوروناز در واریته درخشان گیاه لوبیا وتعیین توالی ژن کد کننده آن
در این تحقیق، تأثیر مهار كنندگیPGIP استخراج شده از هیپوكتیل گیاه لوبیا ( Phaseolus vulgaris ) واریته درخشان روی آنزیم پلی‌گالاكتوروناز جدایه F۱۵ قارچ Fusarium oxysporum (با شدت بیماری‌زایی زیاد) مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حاصله نشان داد که این PGIP قادر است به میزان ۵.۵۴ درصد فعالیت آنزیم PG جدایه فوق را مهار نماید. با توجه به این نتایج جهت بررسی توالی ژن pgip این واریته اقدام به تکثیر، کلون کردن، تعیین توالی و مقایسه آن با توالی ژنهای مشابه گزارش شده گردید. این مقایسه نشان داد که طول ژن کاملpgip در این واریته (درخشان) برابر bp۱۰۲۹ با محتوای GC برابر ۵۰.۱۵ درصد بوده که با توجه به ORF (open reading frame) موجود در آن میتواند یک پلی پپتید بطول ۳۴۲ اسید آمینه را کد نماید. برای اطمینان از صحت توالی بدست آمده علاوه بر استفاده از آنزیم Pfu برای تکثیر ژن مربوطه، تعیین توالی این ژن نیز در دو جهت انجام گرفت. توالی فوق برای تعیین تطابق با توالی ژنهای موجود در بانکهای اطلاعاتی DDBJ, EMBL, GeneBank و PDB مورد استفاده قرار گرفت. نتایج حاصله نشان داد که توالی DNA این ژن با توالی ژن pgip-۱ از لوبیای واریته Saxa به میزان صددرصد مشابهت دارد. همچنین مقایسه این توالی با توالی pgip-۲ از لوبیای واریته Pinto نشان داد که توالی ژن pgip واریته درخشان علاوه بر اضافه داشتن ۲۷ نوکلئوتید در ابتدای ژن، در تعداد ۲۶ نوکلئوتید در طول ژن نیز با توالی pgip-۲ اختلاف دارد.

منبع : مجله زیست‌شناسی ایران